● 어린이 활동 공간 바닥에 사용된 모래 등 토양에서의 기생충(란) 시험 방법

1. 적용 범위
이 규격은 「환경보건법」 제23조제1항 및 같은 법 시행령 제16조제1항 별표2에 따른 어린이 활동공간 환경안전관리기준 제6호의 어린이 활동공간 시설 및 바닥재 위생관리기준 사항 중 해충 관리와 관련하여 모래, 흙 등 토양 중 기생충(란)의 분석방법에 대하여 규정한다.

2. 인용 규격
다음에 인용된 규격은 이 규격에 필수적으로 적용되는 규격이다. 인용규격(모든 개정판 포함)은 별도의 발행연도 표기가 없는 한 인용규격의 최신본을 적용한다.
KS A 5101-1, 시험용체 - 제1부 : 금속 망 체

3. 정의
이 규격에서 이용하는 주된 용어 정의는 다음과 같다.
1) 기생충(란)
애완동물 또는 야생동물의 분변을 통해 오염되는 개회충, 고양이회충, 사자회충 및 토양선충 등을 말한다.

4, 개요
비중이 .05 ~ 1.24 범위인 기생충(란)에 비해 상대적으로 비중이 높은 황산아연 포화용액(비중 1.20)을 사용하여 난각(egg-shell)의 훼손 없이 기생충(란)을 부유시킨 후 현미경으로 검경하여 기생충(란)의 존재유무를 확인하는 방법이다.

5, 장치 및 기구
1) 광학 현미경
100배 ~ 400배 검경이 가능한 광학현미경
2) 원심 분리기
1,500 rpm ~ 2,000 rpm 이상의 원심 분리기
3) 시험용 체
KS A 5101-1에 따라 체 망의 눈 크기 0.5 mm 인 표준체
4) 백금이
5) 분액깔대기
6) 슬라이드 글라스 및 커버 글라스
7) 50mL 코니컬 원심 분리기용 튜브

6. 시약
시약은 별도로 규정되지 않은 한 공인된 분석용 등급의 시약을 사용하며, 물은 증류수 또는 전기 전도도가 0.5 mS/m 이하의 순도를 지닌 정제수를 사용한다.

7. 시험분석용 시료 채취
1) 바닥면을 중심지역과 동, 서, 남, 북 4방위 지역으로 총 5개 지역으로 구분하고 각 지역 내 토양부분에서 동물의 분변이 확인된 곳이나 동물의 출입이 용이한 1곳을 선정한다.
2) 시료는 선정한 각 채취지점으로부터 균등량으로 하여 총 250 g을 토양오염공정시험기준 제3장 1절 1항 1의 나 방법에 따라 채취한다. 채취한 시료는 고르게 혼합하여 입구가 넓은 유리용기에 넣는다.
3) 채취한 시료는 시험 전까지 저온(5 ℃ ± 3 ℃)으로 보관한다.

8. 시료의 분석
1) 시험시료 100 g이 들어있는 비이커에 물 500 mL를 넣고 유리봉을 이용하여 잘 섞어 준 다음 부유물 제거를 위하여 시험용 체로 여과한다.
2) 여과액을 30분간 방치한 후 약 200 mL를 남기고 조심스럽게 상층액을 버린다.
3) 남은 여과액을 분액 깔대기에 먼저 넣는다. 여과액을 담은 용기는 물로 세척한 후 세척한 물을 분액 깔대기에 추가로 넣고 30분간 정치한다.
4) 분액 깔대기 하층의 침전액을 50 mL 코니컬 원심 분리기용 튜브에 옮겨 1,500 rpm 으로 2분간 원심분리 한 후, 상층액은 버린다. 여기에 물을 다시 넣고 2 분간 원심 분리한 후 상층액은 버린다.
5) 50 mL 코니컬 원심 분리기용 튜브에 황산아연 33% 수용액(포화용액)을 넣어 50 mL로 만든 후 1,500 rpm 이상으로 1분간 원심분리 한 후 2분 ~ 5분간 정치한다.
6) 백금이를 이용하여 50 mL 코니컬 원심 분리기용 튜브의 최상층 액을 떠 광학현미경용 슬라이드 글라스위에 놓는다. 슬라이드 표본은 튜브 한 개당 2장 ~ 3장을 제작한다.
7) 슬라이드 글라스에 커버글라스를 덮고 광학현미경에서 100배로 검경한다.
8) 광학현미경에서 100배로 검경할 때 기생충(란) 유사 물체가 관찰되면 400배로 확대하여 이를 확인한 후 기록한다.

9. 시험 결과 표기
튜브 한 개당 제작한 2장 ~ 3장의 슬라이드 표본에서 기생충(란)이 하나라도 확인된 경우 '검출(detected)'로, 관찰되지 않은 경우에는 ‘검출 안 됨(not detected, N.D.)'으로 표기한다.